Livestock Research for Rural Development 1 (1) 1989

Citation of this paper

Uso de árboles forrajeros para el control de protozoarios ruminales

M Rosales*, M Laredo**, Aurora Cuesta**, H Anzola** y Liliana Hernández**

*Fundación CIPAV, AA 20591, Cali, Colombia
**ICA, Tibaitatá, AA 151123, Bogotá, Colombia

[Trabajo realizado con el apoyo de la Fundación Internacional de Ciencia; Reseearch Grant Agreement No. B/1441-1]

Summary

To take advantage of the increases in productivity brought about by defaunation in ruminants fed diets rich in soluble sugars and/or alkali-treated straws, a simple and economical method is needed to remove rumen protozoa. This experiment aimed to provide preliminary data as to the efficacy of tropical tree foliages, on the basis of their known content of phenolic substances, as a means of reducing rumen protozoal numbers.

Three weaned calves (about 150 kg liveweight) were grazed on Kikuyu pasture and received for three days, at 8 am, 400 g/day of a 50/50 mixture of rice oil polishings and sun-dried foliage (leaves and pecioles; mean N content about 3.5% in dry matter) from each of the following trees (Trichantera gigantea, Erythrina poeppigiana and Enterolobium ciclocarpum). None of the foliages reduced protozoal numbers, which were relatively low (1-2 x105/ml) in all animals throughout the trial. This may partly explain the lack of effect.

Key words: Cattle, grazing, Brachiaria, melote, molasses, phenolics, protozarios, fungi, digestibility.

Resumen

Para poder aprovechar los aumentos en la productividad, que resultan cuando se elimina los protozoarios del rumen de ganado consumiendo dietas ricas en azúcares ó tamos tratados con álcalis, se necesita un método sencillo y eficaz para eliminar a los protozoarios ruminales. El fin de este trabajo es proporcionar información preliminar sobre la eficacia de los follajes de tres árboles forrajeros, que contienen sustancias fenólicas en sus hojas; como instrumento para reducir la población ruminal de protozoarios.

Tres novillos de 150 kg peso vivo aproximadamente, con cánulas permanentes en el rumen, los cuales pastoreaban en un potrero de Kikuyo (Pennisetum clandestinum), recibieron diariamente durante tres días a las 8 am, una mezcla de 200 g de harina de arroz y 200 g de follaje seca (hojas y peciolos) procedente de los árboles Nacedero (Trichantera gigantea), Cachimbo (Erythrina poeppigiana) y Orejero (Enterolobium ciclocarpum). Se tomaron muestras de líquido ruminal a las 11 am un día antes, durante los tres días del suministro de los follajes, y por los 12 días siguientes, para conteo de protozoarios y medición de pH y amioniaco. No hubo efectos de los follajes sobre el conteo de protozoarios, el cual era bastante bajo (1-2 x 105/ml) durante todo el muestreo.

Palabras claves: Protozoarios, novillos, follajes, sustancias fenólicas, defaunación.

Introducción

Hay mucha evidencia que comprueba que en dietas de bajo nivel proteico, y/o altos niveles de azúcares o tamos de cereales tratados con álcalis; el reducir la población de protozoarios en el rumen de ovejas y bovinos, conlleva a un aumento de la productividad animal (Demeyer et al 1982; Bird 1988). Sin embargo, la aplicación en la práctica de estos hallazgos se hace difícil debido a la ausencia de un método sencillo y eficaz para controlar estos microorganismos.

La hipótesis que se pretendía averiguar en este trabajo era que las sustancias fenólicas, presentes en muchos de los árboles forrajeros del trópico, pudieran actuar como agentes para controlar las poblaciones de protozoarios en los rumiantes (Leng R A, comunicación personal).

Materiales y métodos forrajes

Se utilizaron las hojas de 3 árboles forrajeros que han sido usados tradicionalmente como suplementos en dietas basadas en caña de azúcar y otros recursos alimenticios tropicales (CIPAV 1987). Estos fueron: Nacedero, Trichantera gigantea; Cachimbo, Erythrina poeppigiana; y Orejero Enterolobium ciclocarpum. Se cosecharon hojas con pecíolos de los tres árboles, se secaron en un secador solar y se molieron en un molino de martillos con una criba de 2 mm.

Tratamientos

Se utilizaron 3 novillos de raza Holstein de aproximadamente 150 kg con canulas permanentes en el rumen. Permanecieron durante el ensayo en una pradera de pasto Kikuyo (Pennisteum clandestinum). Los animales recibieron una mezcla de 200 g/día de harina de arroz y la harina de uno de los follajes experimentales, según el siguiente plan:

Animal 1: 250 g/día de harina de hojas de Orejero
Animal 2: 200 g/día de harina de Nacedero
Animal 3: 200 g/día de harina de Cachimbo

Este suplemento se dió durante 3 días a las 8 a.m..

Mediciones:

Para los 3 días en los cuales se suministró el suplemento, y para los siguientes 12 días, se tomaron muestras de líquido ruminal a las 11 a.m.

Número de protozoarios

Se midió el número de protozoarios en el líquido ruminal siguiendo la siguiente metodologia:

La muestra de líquido ruminal se filtró con una tela y se diluyó en una solución de Formol salino en proporción de 1 parte de líquido ruminal y 4 de Formol salino (Formol al 37% y solución salina 0.9% (Suero fisiológico) en proporción de 1:9). El Formol mata los protozoarios y la solución salina previene la lisis.

Se sacó 1 ml de esta solución y se le adicionó 9 ml de agua destilada y se centrifugó a 2000 rpm durante 20 minutos. Se separó el sedimento y se le añadió 1 ml de sulfato de zinc al 40%. Esto sirve para limpiar la muestra. Después se decantaron los protozoarios. Se volvió a centrifugar y se le adicionó al sedimento 0.2 ml de lugol para pigmentar los protozoarios.

Los protozoarios se contaron en 10 cuadros al azar en una cámara Chamber, que es mejor que la cámara de Neubauer, pues tiene mayor profundidad (0.2 mm) y mayor número de cuadrículas y de esta forma se puede contar un mayor número de protozoos reduciendo con esto la probabilidad de error.

A los resultados finales se le adicionaron el 20% de pérdidas de fauna debido a la centrifugación. Este factor se había calculado anteriormente, con base de comparaciones entre muestras centrifugadas y sin centrifugar.

Se determinaron las proporciones de los diferentes géneros de protozoarios.

Conteo de bacterias

Del sobrenadante que quedó después de la primera centrifugación se sacaron 0.2 ml y se le adicionó 0.2 ml de Lugol. Se realizó el conteo en una cámara "Neubauer" con profundidad de 0.1 mm.

Se corrigió el conteo, suponiendo la misma perdida de 20% debido a la centrifugación.

Análisis químicos en el líquido ruminal:

Se midió el pH mediante un potenciómetro y la concentración de amoníaco por el método de destilación al vapor.

Resultados y discusión

Cuadro 1: Número de protozoos (x10-5/ml) encontrados en el rumen, en animales consumiendo una dieta básica de Kikuyo y suplementados con follaje seco de tres árboles
Días Orejero Cachimbo Nacedero
0 1.2 1.8 1.6
1 1.4 3.2 1.8
2 1.4 1.3 2.5
3 1.2 1.2 2.0
4 1.4 0.6 1.0
5 0.9 1.0 1.4
6 1.9 0.5 0.4
7 1.6 1.6 0.9
8 1.2 1.3 1.1
9 1.5 1.2 1.1
10 1.6 2.0 1.6
11 1.4 1.6 2.8
12 0.9 1.6 2.5
13 0.7 1.7 4.1
14 1.3 2.7 3.9
15 1.2 1.4 2.4
       
Promedio 1.28 1.54 1.94
Desviación Estandar ±0.29 ±0.68 ±1.04

Error estandar del promedio ±0.18 (P = 0.04)

 

Los conteos de protozoarios (Cuadro 1) no revelaron tendencias significativas durante el período del muestreo (r = 0.53, -0.29 y -0.13 , para nacedero, orejero y cachimbo, respectivamente) lo que sugiere que los follajes no tenían efecto defaunador, o que la cantidad suministrada no fué suficiente. Otro factor que pudiera haber influido fueron las bajas poblaciones de protozoarios que resultaron debido a la dieta usada.

Debido a la poca cantidad de follajes disponibles para el ensayo, no fué posible hacer comparaciones eliminado el efecto animal, y este quedó confundido el efecto del tipo de follaje.

Conteo de bacterias

Cuadro 2: Número de bacterias (# de Bacterias 109/ml)en el líquido ruminal
Días Cachimbo Orejero Nacedero
0 2.50 3.20 3.20
1 2.00 2.50 1.90
2 1.30 2.50 1.80
3 2.10 2.70 1.50
4 1.40 2.30 2.20
5 1.20 2.30 2.70
6 1.50 1.60 2.40
7 2.50 2.00 1.70
8 1.40 1.60 2.20
9 1.20 2.10 1.80
10 2.00 2.00 1.70
11 2.20 2.30 2.00
12 1.80 1.40 2.20
13 1.30 1.30 2.80
14 1.00 1.50 2.60
15 0.80 1.40 1.40
       
Promedio 1.63 1.96 2.13
Desviación estandar 0.526 0.62 0.504

 

El conteo de bacterias en el líquido ruminal durante el ensayo se presenta en el Cuadro 2. El conteo de bacterias fue más alto en el animal que recibía el follaje de nacedero y más bajo en el animal que recibió cachimbo. Sin embargo, estos efectos no se pueden atribuir a los follajes por las razones ya expuestas. Hubo una reducción (r = -0.84) en el conteo de bacterias durante el período del muestreo en el animal recibiendo el follaje de orejero. Una tendencia similar (r = -0.46) se notó en el animal al cual se suminstró el cachimbo. No hubo cambios en el animal con nacedero (r = -0.1).

Géneros de protozoarios

Cuadro 3: Clasificación de los géneros de protozoos encontrados en terneros Holstein suplementados con árboles forrajeros
Género Orejero Cachimbo Nacedero
Entodinium sp 80% 57% 74%
Diplodinium sp 18% 14% 14%
Euplodinium sp 1% 4% 9%
Epidinium ecaudatum 0% 5% 2%
Isotricha prostoma 1% 20% 1%

Expresados como porcentaje del número total (promedios de todas las observaciones).

 

Predominó el género Entodinium en todos los animales que es de esperarse, tomando en cuenta la naturaleza de la dieta básica (Jouany 1988).

pH y amoníaco ruminal

El pH estaba en en el rango de 5.8 y 7.25, con promedios de 6.44±0.11, 6.8±0.10 y 6.7±0.13 para los animales que recibieron nacedero, orejero y cachimbo respectivamente. Estos valores se encuentran dentro del rango óptimo para los protozoarios, el cual es de 5.5 a 8.0 (Coleman 1988).

Cuadro 4: Variación de los niveles del amoniaco
Dias Nacedero Cachimbo Orejero
1 28.00 28.00 28.00
2 18.30 16.00 20.80
3 9.90 12.80 14.80
4 5.20 8.10 8.00
5 7.00 3.20 7.90
6 3.80 6.10 7.70
7 3.20 14.40 11.20
8 4.20 16.30 11.50
9 5.20 7.40 11.20
10 7.00 7.00 5.50
11 5.60 8.60 7.40
12 6.70 13.10 15.70
13 6.60 13.40 15.10
14 6.40 15.10 16.00
15 6.40 6.70 17.00
16 6.50 2.90 14.70
       
Promedio 8.12 11.2 12.84
Desv estandar ±6.3 ±6.3 ±5.9

 

Los niveles de amoníaco, en general son bajos, típicos de animales en pastoreo, que no reciben suplementación de nitrógeno fermentable. No hubo tendencias marcadas según el período de muestreo.

Conclusiones

Los resultados de este ensayo preliminar no demostró ninguna tendencia clara sobre el posible uso de los follajes arbóreos como agentes para controlar los protozoarios en los rumiantes. La baja población de estos organismos debido a la naturaleza de la dieta básica, pudiera haber sido el factor limitante. Normalmente, cuando hay efectos de la defaunación los animales testigo tienen poblaciones de protozoarios del orden de 5-8 x 105 (ver Leng 1988). Otro factor que debe estudiarse es el efecto de la cantidad de follaje y el tiempo necesario para lograr un control eficaz de estos organismos.

Reconocimientos

Este trabajo se realizó con el apoyo de la Fundación Internacional de Ciencia, según el "Research Grant Agreement; B/1441-1".

Referencias

Bird S H 1988 Production from ciliate-free ruminants. In: The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul Books:Armidale, Australia.

CIPAV 1987 Ajuste de los sistemas pecuarios a los recursos tropicales. Suplemento Ganadero (Bogota, Colombia) 7:1-72

Coleman G S 1988 Protozoal-bacterial interaction in the rumen. In: The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul Books:Armidale, Australia

Demeyer D I, van Nevel C J and van de Voord G 1981 The effects of defaunation on the growth of lambs fed three urea containing diets. Archives fur Tierernahrung 32:595-604

Jouany J P 1988 Effects of diet on populations of rumen protozoa in relation to fibre digestion. In: The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul Books:Armidale, Australia

Leng R A 1988 The dynamics of protozoa in the rumen. In: The Roles of Protozoa and Fungi in Ruminant Digestion (Editors: J V Nolan, R A Leng y D I Demeyer). Penambul Books:Armidale, Australia.