Epidémiologie de la fasciolose bovine au Bénin et essai de lutte biologique

M N Assogba, J T Dougnon, I T Alkoiret*, Y Akpo, M Boukari et A K I Youssao

Département de Production et Santé Animale / Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi, Université d’Abomey-Calavi, 01 BP 2009 Cotonou, Bénin
* Faculté d’Agronomie de Parakou / Université de Parakou, B.P. 123, Parakou, Bénin
iyoussao@yahoo.fr

Résumé

L’étude épidémiologique de la fasciolose bovine à Fasciola gigantica (Cobbold 1885) au Bénin a été conduite par les méthodes d’examen coprologique des fèces de bovin, d’examen des foies de bovin dans les principaux abattoirs du Bénin, par un diagnostic parasitologique de Radix natalensis (Krauss 1848).

 

La coprologie a révélé que la fasciolose existe au Bénin avec des taux d’infestation inférieurs à 1 % dans le Littoral (Sud du Bénin) et le Borgou (Nord Bénin), contre 13,1 % dans l’Alibori (extrême-Nord-Bénin) et 21,4 % à Gaya (vallée du fleuve Niger). L’examen des foies a donné des prévalences mensuelles moyennes de 6,3%, 6,8% et 24,8%, respectivement dans les abattoirs de Cotonou (département du Littoral), de Parakou (département du Borgou) et de Malanville (département de l’Alibori). Contrairement au sud Bénin, l’étude parasitologique de Radix natalensis a révélé que les limnées du Nord-Bénin sont naturellement infectées par les miracidium de F. gigantica d’oú la pérennité de la fasciolose dans le Nord-Bénin et sa rareté dans le Sud-Bénin. Une contribution à la lutte biologique contre la fasciolose a été possible grâce à un diptère Sciomyzidae, Sepedon ruficeps, dont les larves lors d’un cycle de développement ont consommé 12,13 ± 2,48 à 53,16 ± 4,74 et 15,03 ± 1,94 à 54,46 ± 5,23 Radix natalensis, respectivement non infectés et infectés de diverses classes de tailles.

Mots clés: Coprologie, Fasciola gigantica, foie, Radix natalensis, Sciomyzidae, Sepedon ruficeps

Epidemiology of cattle fasiolosis in Benin and biological control

Abstract

The epidemiological survey of cattle fasciolosis due to Fasciola gigantica (Cobbold 1885) in Benin was carried out by the methods of coprological examination of cattles, the cattle livers examination in the main slaughterhouses of Benin, by a parasitological survey on Radix natalensis (Krauss 1848).

The coprology revealed that the fasciolosis exists in Benin with some infestation rates lower than 1% in the Department of Littoral (South of Benin) and Borgou (North of Benin, to 13.1% in Alibori (Extreme North of Benin) and 21.4% in Gaya (Valley of Niger river). The examination of cattle livers showed an average monthly prevalences of 6.3%; 6.8% and 24.8% respectively for the slaughterhouses of Cotonou (South - Benin), Parakou (Department of Borgou) and Malanville (Department of Alibori). Contrary to the South of Benin, the parasitological study of Radix natalensis reveled that the Lymnaea of the North-Benin are naturally infected by the miracidiums of Fasciola gigantica, main reason of the perennity of fasciolosis in the North - Benin and its rarity in the South - Benin. A  contribution to the biologic control against fasciolosis was possible thanks to a dipteral Sciomyzidae, Sepedon Parasepedon ruficeps, whose larva had consumed at the time of development cycle from 12.1 ± 2.48 to 53.5 ± 4.74 and from 15 ± 1,94 to 54.5 ± 5,23 Radixes natalensis, respectively non-infected and infected of various classes of sizes.   

Key-words: Coprology, Fasciola gigantica, liver, Radix natalensis, Sciomyzidae, Sepedon ruficeps

Introduction

La fasciolose bovine est une helminthose du foie provoquée par des trématodes du genre Fasciola et dont l'espèce Fasciola gigantica Cobbold, 1885 a été décrite en Afrique occidentale (Chartier et al 2000). L'importance économique de la fasciolose bovine est très grande en considérant le poids vifs anormalement faible des animaux, estimées à 25% du poids des témoins (Gretillat 1961). Cette parasitose est caractérisée par une hépatite parenchymateuse qui fait progressivement place à une cholangite, puis à une cirrhose (Kabore et al 1993). Pour mieux connaître cette parasitose au Bénin, des investigations ont été menées sur la prévalence de la fasciolose bovine à travers des analyses coprologiques, l’examen des lésions du foie rencontrées aux abattoirs et l’étude parasitologique du mollusque hôte intermédiaire (Radix natalensis ou Lymnaea natalensis). Cette étude épidémiologique est complétée par un essai de lutte biologique par l’action d’un diptère prédateur Sepedon parasepedon ruficeps Becker, 1923 (Assogba 2002 ; Assogba 2004). Le but de cette synthèse est de faire le point des travaux effectués sur la fasciolose au Bénin de 1994 à 2004. 

Matériel et méthodes

Milieu d’étude 

Les travaux se sont déroulés aussi bien dans le Nord que dans le Sud du Bénin. La région septentrionale du Bénin a un climat de type soudano-sahélien avec deux saisons. La saison pluvieuse va d’avril (93,8 mm de pluie) à octobre (56,6 mm de pluie) avec un maximum de 292,7 mm de pluie en juillet (ASECNA 2004). La saison sèche comporte une période froide (novembre à février) et une période chaude (mars à mai). La région sud-Bénin a un climat de type subéquatorial avec 4 saisons : une courte saison sèche (15 juillet au 15 septembre), une courte saison pluvieuse (15 septembre au 15 novembre), une longue saison sèche (15 novembre au 15 mars) et une longue saison pluvieuse, 15 mars au 15 juillet (Adam et Boko 1983). La région montagneuse de l’Atacora bénéficie d’un climat très humide et doux. 

Matériel expérimental 

Le matériel animal est constitué de bovins (zébus et taurins), de limnées (Photo 1a), de Fasciola gigantica adulte (Photo 1b), d’oeufs de Fasciola gigantica (Photo 1c), de Sepedon ruficeps adultes (Photo 1d) ou à l’état larvaire (Photo1e).   

Le matériel technique est composé d’un microscope photonique binoculaire, de diverses verreries de laboratoire, de spatule, de passe-thé de maille 0,1 mm, d’une glacière, d’une solution de bleu de méthylène, des lames et lamelles pour les analyses coprologiques ; des bocaux de prélèvement, de pinces souples, de papier millimétré, d’aquariums et d’une loupe binoculaire pour l’étude malacologique.

Méthodes de travail

Prélèvements et analyses coprologiques 

 

Un total de 3600 prélèvements de fèces a été réalisé sur des bovins d’octobre 1995 à septembre 1996 à raison de 300 échantillons par mois et dont 20 à Gaya, 80 dans l'Alibori, 100 dans le Borgou et 100 dans le Littoral. Dans le Littoral, ces prélèvements ont eu lieu dans les troupeaux des environs de Cotonou. Dans le Borgou, les prélèvements ont été faits chez les animaux d'embouche qui pâturaient aux environs du point d'eau de Karegoussou dans la ville de Parakou et sur des animaux d'élevage aux environs de la même ville. Les troupeaux des villes de Guéné, Karimama et Malanville situés aux abords ou aux environs du fleuve Niger ont été choisis pour les prélèvements de l'Alibori, il en est de même pour les troupeaux de Gaya, situé à 6 km de Malanville dans le territoire nigérien et en bordure du fleuve Niger.  

Les prélèvements de matière fécale ont été réalisés par voie rectale à l’aide d’un sachet plastique entre 7 et 9 heures, avant la conduite des animaux au pâturage. Dès qu'une quantité suffisante de matière fécale était prélevée, le sachet était retourné et soigneusement noué. La conservation des prélèvements a été réalisée au froid à + 4°C pendant quelques jours avant l'observation des œufs des parasites au laboratoire. La technique coproscopique utilisée est la méthode qualitative avec concentration par sédimentation simple (Chartier et al 2000). Cette technique a permis de mettre en évidence la présence des œufs de Fasciola gigantica.  

Examen des foies aux abattoirs 

Cette enquête a été réalisée sur un effectif de 5117 bovins abattus dans les abattoirs de Malanville, de Parakou et de Cotonou. Ces abattoirs ont été choisis en fonction de leur capacité d'abattage et de leur situation géographique (Photo 2).

Le nombre de bovins examinés a été de 1058 dont 46,36 % de zébus et 53,64 % de taurins à l’abattoir de Cotonou. En moyenne, 30 bovins sont abattus par jour à Cotonou. A l’abattoir de Parakou, 20 bovins sont abattus par jour en moyenne et le nombre d'animaux examinés est de 2389 bovins dont 92,15 % de taurins de race Borgou et 7,85 % de zébus. Enfin, l'abattoir de Malanville a été retenu pour l'extrême Nord du Bénin dans le département de l'Alibori. Au cours des inspections dans cet abattoir, 1680 bovins ont été examinés dont 5,99 % de race Borgou et 94,01 % de zébus. En moyenne, 12 bovins sont abattus par jour à Malanville. En somme, l'effectif de foies examinés a été de 2864 et 2253, respectivement pour les taurins et les zébus. Tous les animaux abattus ont subi une inspection classique et seuls les foies infestés par les grandes douves (Fasciola gigantica) ont été utilisés pour la dissection et le comptage des grandes douves. Après l'examen de l'aspect général du foie infesté (hypertrophie, angiocholite) à l'abattoir, le parenchyme hépatique a été incisé. Une pression manuelle est exercée sur les canaux biliaires pour extraire les grandes douves qui y sont logées. Ensuite, la totalité du foie a été disséquée pour récupérer les parasites. L'origine et la race des animaux, le nombre de foies examinés et le nombre de foies infestés ont été notés. Parmi les foies infestés, trois classes ont été constituées : les foies contenant moins de 20 grandes douves sont classés dans le groupe des animaux les moins infestés ; ceux qui sont moyennement infestés hébergeaient 20 à 50 grandes douves ; enfin, les bovins dont le foie contenait plus de 50 grandes douves sont classés dans le groupe des animaux hautement infestés.  

Collecte et élevage des limnées 

Des enquêtes sur l'identification des points d'eau abritant Radix natalensis ont été réalisées dans 21 sites localisés dans tous les départements du Bénin. Ces différents sites ont été choisis en raison de la fréquentation des animaux au cours du pâturage. Les points d'eau retenus ont été visités une première fois en saison pluvieuse et une seconde fois en saison sèche en 1995. La récolte des mollusques a été faite avec des pinces et une épuisette munie d'un long manche qui permet de racler le fond et d'atteindre les mollusques sur les racines des végétaux aquatiques. Tous les mollusques ont été conservés dans des pots de prélèvement. La distribution saisonnière de Radix natalensis dans les sites de Cotonou, Djeffa et Parakou a été suivie d'octobre 1996 à septembre 1997. Les mollusques récoltés étaient rapportés au laboratoire pour déterminer la densité, la mensuration et le taux d'infestation. La densité est le nombre total de mollusques récoltés en 15 minutes par personne. La collecte des limnées a été réalisée par un seul collecteur. La taille des Radix natalensis récoltés a été mesurée sur un papier millimétré. La détermination du taux d’infestation a été faite en les exposant sous la lumière d'une loupe binoculaire ou directement par dissection de l'hépatopancréas et observation à la loupe binoculaire. A chaque visite, les cas de mortalité de Radix natalensis ont été recensés. 

Mensuration des limnées  

Les limnées nées au laboratoire ont été utilisées pour les expérimentations. A l’aide d’un papier millimétré placé sous une vitre, nous avons mesuré la longueur des limnées posées sur cette vitre au moyen d’une cuillère en plastique. Après mensuration, les limnées ont été réparties en 3 classes :

• Classe 1 (C₁) : limnées de 0 à 3 mm
• Classe 2 (C₂) : limnées de 3 à 6 mm
• Classe 3 (C₃) : limnées de taille > 6mm

 

Isolement et manipulation des œufs de Fasciola gigantica

 

Au total, 16 vésicules biliaires de foies de bovins infestés ont été choisies au hasard et utilisées pour l’isolement des œufs de Fasciola gigantica. Au laboratoire, le contenu de la vésicule biliaire a été déversé dans un bocal puis décanté plusieurs fois avec l’eau de robinet jusqu’à l’obtention d’un dépôt brun, constitué des œufs de F. gigantica semblables à de petits grains de sable. Les œufs ont été ensuite répartis dans des tubes à essai. Un mélange aqueux d’antibiotiques composé de pénicilline G (50%) et de streptomycine (50%) a été ajouté à chaque tube pour éviter la destruction des œufs par les bactéries dans chaque tube. Chaque tube à essai ainsi préparé a été bouché à l’aide d’une couche de coton suffisamment mince pour permettre l’aération et limiter diverses contaminations par l’intermédiaire de la poussière. L’incubation des œufs a eu lieu à 30°C dans l’incubateur pour certains tubes et à la température du laboratoire (28°C) pour le reste (Fagbemi et Obarisiagbon 1991). Les miracidia obtenus ont été recueillis dans des tubes à essai pour l’infection des limnées.

 

Infection des limnées

 

Après l’obtention des miracidia, les limnées ont été répartis dans les boîtes de Pétri à raison d’une limnée par boîte. Les boîtes ont été éclairées au moyen d’une lampe électrique de 40 watts afin de stimuler le déplacement des miracidia pour une fixation sur des limnées.

 

Capture de Sepedon (P) ruficeps adulte

 

La capture de Sepedon ruficeps adulte a été faite au niveau de la végétation des bas-fonds et des marécages à l’aide d’un filet fauchoir. Les captures ont eu lieu de préférence la matinée entre 7 heures et 9 heures ou l’après-midi de 17 heures à 19 heures. A ces périodes de la journée, les mouches étaient présentes en abondance. Le matériel récolté à Djeffa s’élevait à 45 sciomyzides, notamment l’espèce Sepedon ruficeps,  dont 20 femelles et 25 mâles après 8 sorties. Le cumul des récoltes à Cotonou après 6 sorties était de 24 Sepedon ruficeps dont 8 femelles et 16 mâles. L’échantillonnage n’est pas ici nécessaire car l’objectif est d’obtenir des larves de Sepedon ruficeps comme matériel biologique d’expérimentation.

 

Reproduction et élevage de Sepedon (P) ruficeps adulte

 

Les sciomyzides récoltés dans la nature ont été ramenés au laboratoire où l’élevage a été effectué dans des boîtes de forme cylindrique de 7 cm de diamètre sur 11,5 cm de hauteur. La paroi de la boîte était munie de 2 ouvertures :

• une grande, de 4 cm de diamètre, recouverte d’une toile grillagée à mailles fines permettant l’aération de la boîte ;

• une petite, de 1,2 cm de diamètre, munie d’un bouchon et facilitant les diverses manipulations lors du nettoyage des boîtes.  

A l’intérieur de chaque boîte d’élevage, étaient disposés :

• du papier filtre pour tapisser le fond. Ce papier est humidifié quotidiennement ;

• une capsule de bière contenant l’aliment composé d’un mélange de miel et de farine de manioc ou de provende de poulet de chair ;

• l’eau d’abreuvement dans un petit bocal en plastique surmonté d’une mousse.

Les imagos sont produits trois fois par semaine. Dans les conditions de température et de propreté sus-mentionnées, les sciomyzides femelles ont pondu des œufs isolément ou en amas sur les parois de la boîte ou sur son couvercle. Les œufs ont été décollés avec soin à l’aide d’un pinceau préalablement imbibé d’eau afin de ne pas abîmer leur chorion. 

Les œufs décollés ont été incubés dans des boîtes de Pétri de 5 cm de diamètre. Le fond des boîtes était tapissé d’un papier filtre maintenu constamment humide pour éviter la déshydratation des œufs, puis des jeunes larves. 

L’élevage des stades larvaires de Sepedon ruficeps a eu lieu dans de petites boîtes cylindriques de 3 cm de diamètre sur 5 cm de hauteur. Dans chaque boîte, nous avons mis de l’eau jusqu’à 2 cm de hauteur ; de la laitue et des limnées. Le nombre de limnées par boîte était de 5. Des observations régulières dans la journée ont permis de remplacer les limnées consommées par des limnées de la même classe. La laitue a servi non seulement de nourriture pour les limnées, mais aussi de support qui a favorisé le contact entre les larves et les limnées. Les boîtes d’élevage des larves ont été nettoyées quotidiennement. Les limnées non consommées n’ont pas été comptées.  L’évolution des 3 stades larvaires a été notée : larve de 1^er stade (L₁) ; larve de 2^ème stade (L₂) et larve de 3^e stade (L₃). Les larves ont été nourries avec des limnées infectées par des miracidia ou des limnées non infectées. Le passage du stade L₁ à L₂ et de L₂ à L₃ s’est fait par des mues. La fin du stade larvaire L₃ a été marquée par la formation d’une pupe. Elle a été ensuite placée dans une boîte vide ou dans une boîte munie de coton mouillé. La pupe est une masse sub-cylindrique gris-noir de 6 à 8 mm de long. Elle possède deux extrémités : l’une postérieure légèrement effilée et l’autre antérieure arrondie, d’où sortira l’imago. La pupe, lorsqu’elle est manipulée avec soin, donne une mouche adulte. L’éclosion a lieu 6 à 7 jours plus tard. Quatre vingt à quatre vingt dix pourcent des pupes ont évolué en imagos. La durée totale du cycle variait de 16 à 23 jours. Cette durée pouvait s’allonger si la quantité de mollusques-proies était insuffisante. 

Analyse statistique

La prévalence de la fasciolose bovine est le pourcentage du nombre d’animaux parasités par F. gigantica sur l’effectif total des animaux examinés. Elle a été calculée par département, par abattoir ou par race. Les prévalences ont été comparées par le test de chi-carré en utilisant la procédure Proc freq du logiciel SAS (Statistical Analysis System 1996). Le nombre de limées consommées a été calculé par stade larvaire et par classe de limées à la suite de l’analyse de variance en utilisant la procédure des modèles linéaires généralisés du SAS (Statistical Analysis System 1996). Les moyennes de limnées consommées ont été comparées deux à deux par le test de t de student.

Résultats

Prévalence de la fasciolose bovine par coprologie 

Les prévalences de la fasciolose bovine par la coprologie ont varié d’une région à l’autre (p<0,001). Dans le Littoral et le Borgou, le taux d’infestation était inférieur à 1 %, contre 13,1 % pour l’Alibori et 21,4 % pour Gaya. Dans les régions de Gaya et d’Alibori, la fasciolose a été observée toute l’année. Dans le Borgou, des cas ont été rencontrés en octobre et en novembre avec des prévalences mensuelles de 3 % ; puis en janvier (1 %) et en septembre (1 %). Dans le Littoral, les cas de fasciolose ont été également observés en mai, juin et juillet avec respectivement des prévalences de 1, 2, et 2 %. La prévalence varie également selon le mois de prélèvement dans l’ensemble des cas observés (p < 0,05). Elle décroît d’octobre à janvier, atteint son plancher en février et en mars et croît d’avril à août.

Dans la vallée du fleuve Niger, ces prévalences ont été de 33,3 %, 25 % et 51,4 % respectivement à Malanville, Karimama et Gaya en octobre 1995. En mars 1996, elles ont diminué significativement (p < 0,001), avec des valeurs de 7,5 %, 10 % et 15 % respectivement à Malanville, Karimama et Gaya. Les prévalences étaient importantes vers la fin de la saison des pluies ou au début de la saison sèche (octobre-novembre) (Figure 1).

Prévalence de la fasciolose bovine par examen de foies 

La prévalence de la fasciolose a varié d'un abattoir à l'autre (p<0,001). Le taux d'infestation en Fasciola gigantica le plus important a été de 24,8 % à Malanville et diffère significativement (p<0,05) de ceux de Parakou (6,8%) et de Cotonou (6,3%) (Tableau 1). Les zébus ont été plus infestés que les taurins (1,8 vs 23,0%) à Malanville. Les taurins ont été moins infestés à Parakou que dans les autres abattoirs, alors que l'infestation des zébus augmente du Sud au Nord (p<0,05). Les foies faiblement et moyennement infestés ont été plus observés à Malanville, tandis que ceux qui étaient hautement infestés ont été plus recensés à Parakou (Tableau 1).