Efecto del ensilaje de vísceras de trucha (Oncorhynchus mykiss) sobre el comportamiento productivo y el contenido de ácidos omega-3 en hígado, muslos y pechuga, de pollos de engorde

L Betancourt, G J Díaz*, X Aguilar y J Ríos

Facultad de Zootecnia, Universidad de La Salle Cra. 7 No. 172-85, Bogotá, Colombia.
*UnidadToxicología Veterinaria, Universidad Nacional de Colombia
lbetancourt@lasalle.edu.co

Resumen

Se hizo un estudio para investigar el efecto de la inclusión de 0, 10 y 20% de ensilaje de víscera de trucha (EVT), en la dieta de pollos de engorde en etapa de finalización. Las variables evaluadas fueron, comportamiento productivo, contenido de grasa abdominal y composición de ácidos grasos del músculo de pierna, pechuga e hígado.

El mejor peso corporal al sacrificio se obtuvo en los grupos que recibieron 20% de EVT (P<0.05). No se observaron diferencias en el contenido de grasa abdominal, pero el contenido de grasa en el músculo se incrementó con la inclusión de EVT (P<0.05). El porcentaje de ácido ecicosapentaenoico (EPA) y ácido graso docosahexaenoico (DHA), dos ácidos grasos importantes, en pollos alimentados con el 20% de EVT fueron 4 y 15.2% en hígado; 1.5 y 5% en pechuga y 1.5 y 2.3% en muslo, respectivamente. No se detectaron esos ácidos grasos en tejidos del grupo control (0% EVT). La relación entre ácidos grasos omega-6 y ácidos grasos omega-3 (n-6/n-3) se redujo de 29.7 en pollos del grupo control a 1.7 en pollos alimentados con 20% de EVT.

Los resultados indican que es posible enriquecer la carne de pollo con ácidos grasos omega-3 mediante la inclusión de EVT en la dieta.

Palabras clave: ácidos grasos omega-3, comportamiento productivo, ensilaje, pollos de engorde

Effect of ensiled trout (Oncorhynchus mykiss) intestines on productive traits of broiler chickens and the content of omega-3 fatty acids in liver, thighs and breast

Abstract

A study was conducted to investigate the effect of the dietary inclusion of three levels of trout by-product silage (TBPS, 0, 10 and 20%) on broiler chicken practical finisher diets. The variables evaluated were performance parameters, total fat content, abdominal fat content, and fatty acid composition of thigh muscle, breast muscle, and liver.

The highest final body weight was obtained with the chickens receiving 20% TBPS (P<0.05). No significant differences in abdominal fat content were observed but the muscle fat content increased with the inclusion of TBPS (P<0.05). The percent content of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoico (DHA), two key omega-3 fatty acids, in chicken fed 20% TBPS was 4 and 15.2% in liver, 1.5 and 5.0% in breast muscle, and 1.5% and 2.3% in thigh muscle, respectively. In contrast, no was detected these fatty acids in control birds (0% TBPS). The relationship between total omega-6 fatty acids (n-6) and total omega-3 (n-3) fatty acid (n-6/n-3) was reduced from 29.7 in control birds to 1.7 inc chickens fed 20% TBPS in breast muscle.

The results of the present study indicate the feasibility of enriching chicken meat with omega-3 fatty acids, through the dietary inclusion of TBPS.

Key words: chicken meat, DHA, EPA, n-3 fatty acids, silage

Introducción

La acuicultura ha tenido un crecimiento activo en los últimos años, siendo la trucha una especie con buen potencial de producción para el mercado nacional e internacional (INPA 2002, Villanada y Beltran 2001, Ponce y Gernat 2002). Los subproductos representan alrededor de 36% del pescado procesado y son una fuente potencial de proteína y de energía para la alimentación animal (Ponce y Gernat 2002). Sin embargo, estos subproductos no se han utilizado eficientemente y generan serios problemas de contaminación ambiental a los productores de trucha. La fermentación bacteriana anaerobia (Bertullo 1994, Fagberno y Jauncey 1998, Tomé et al 1995) se constituye en una alternativa de conservación y manejo de estos subproductos.

La víscera de pescado se ha evaluado como fuente de proteína y energía en dietas para animales. Entre ellos, Rodríguez et al (1990) en pollos de engorde, Bermúdez et al (1999) en cerdos, Valencia et al (1994) en alevinos de cachama y Correa y Palomino (2000) en alevinos de trucha. Pero no se han realizado suficientes estudios para valorar este subproducto como fuente de ácidos grasos n-3. Se ha demostrado que los ácidos grasos

n-3 reducen enfermedades coronarias (Temple 1996), tienen un efecto hipolipidémico antitrombótico y antiinflamatorio en modelos animales y cultivo de tejidos (Weber y Leaf 1991), además, pueden prevenir y tratar enfermedades como artritis reumatoide (Kremer 1996), desórdenes autoinmunes y cáncer (Pandalai et al 1996, Lewis et al 2000, Simopoulos 2000, Weber y Leaf 1991).

La industria de alimentos está tomando en consideración estas recomendaciones y hoy en día se comercializan alimentos enriquecidos con ácidos grasos n-3, como el ácido α-linolénico (C18:3n-3), el ácido eicosapentaenoico (C20:5n-3) y docosahexenoico (C22:6n-3) (Lewis et al 2000).

La modificación de la composición de ácidos grasos en la canal del pollo de engorde mediante la dieta, podría incrementar la demanda de este producto como un alimento funcional (González y Leeson 2001, López-Ferrer et al 2001). Lo anterior se logra por medio de la inclusión en la dieta de aceites vegetales (López-Ferrer et al 1999, Crespo y García 2002) o aceites de pescado (López-Ferrer et al 2001), pero las grasas vegetales como el aceite de lino son menos efectivas que las grasas de pescado para enriquecer la carne de con ácidos grasos poliinsaturados de la serie omega-3 (Caston y Leeson 1990).

Debido a que en un estudio previo se comprobó que la grasa del ensilaje de víscera de trucha (EVT) tiene un 14.2% de ácidos grasos omega-3 (Betancourt et al 2003), se planteó el presente estudio con el fin de evaluar el efecto de diferentes niveles de inclusión de EVT en la dieta de pollos de engorde sobre la composición de ácidos grasos en la canal y sobre los parámetros productivos.

Materiales y Métodos

El presente estudio se realizó en las instalaciones de la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (Corpoica), con una temperatura promedio de 14º C y a una altitud de 2620 msnm. Se utilizaron 150 pollos de engorde mixtos de la estirpe Ross de un día de edad, alojados en 15 baterías de 10 pollitos cada unidad experimental, se suministró alimento comercial hasta el día 21 de edad. A partir de esta edad se suministraron las dietas experimentales de crecimiento hasta el día 35 y de finalización del día 35 hasta el día 42 (tabla 1).

Preparación de los silos: se molieron 200 kg de víscera de trucha procedentes de una granja comercial, se mezclaron con 15% de melaza, 0.2% de Lactobacillusbulgaricus, 0.1% de sorbato de potasio como antimicótico y 50 ml/kg de extracto de cebolla como antioxidante (Fagberno y Jauncey 1998, Bello 1994). La mezcla se almacenó en recipientes plásticos de 50 kg de capacidad tapados herméticamente. Los recipientes se agitaron manualmente durante tres veces al día con el fin de homogeinizar el proceso de fermentación. La fermentación se mantuvo durante 30 días hasta obtener una licuefacción total del ensilado.

Una vez destapados los silos se midió el pH, se realizó el análisis microbiológico para mesófilos aerobios viables, Clostridium, Coliformes totales, Escherichiacoli, Salmonella, hongos y levaduras, siguiendo la metodología de Silvestri (2001), el análisis bromatológico se realizó siguiendo el método de la AOAC (1990).

Las dietas experimentales se elaboraron con 0%, 10% y 20% de inclusión de EVT (Tabla 1), el aporte de energía para el ensilado se estimó a partir del porcentaje de proteína y de grasa según la ecuación de Jensen (NRC 1994) para subproductos de origen animal como:

EM kcal/kg = 31.02*PC + 78.87*EE,

donde EM es la energía metabolizable, PC es la proteína cruda y EE es el extracto etéreo.

Parámetros productivos

Se registró semanalmente el peso corporal, el consumo diario de alimento y la ganancia de peso. La conversión alimenticia se calculó a partir de estos resultados. Los datos se tomaron de cada unidad experimental (cinco réplicas por tratamiento).

Evaluación de la canal

Los pollos de engorde se sacrificaron a los 42 días, de tres réplicas por cada tratamiento (2 pollos por réplica) se separó la grasa abdominal (grasa circundante de la bolsa de fabricio, cloaca y músculos adyacentes) y se peso individualmente, se extrajeron 250g de músculo de pechuga y muslo y el hígado en su totalidad, se liofilizaron a -78C para el estudio de ácidos grasos.

Análisis de ácidos grasos

Se tomaron 4 g de tejido liofilizado, se homogenizaron con 40 ml de una solución cloroformo:metanol 2:1 (Folch et al 1957. El homogenizado se filtró y se colectaron 20 ml de filtrado a los cuales se agregó 5ml de agua destilada. Esta mezcla se centrifugó a 3000 rpm durante 20 minutos. Se eliminó el sobrenadante, se tomó 1ml de la fase inferior orgánica en un tubo de ensayo previamente pesado y se evaporó el solvente bajo una corriente suave de nitrógeno. Los lípidos secos se resolubilizaron con una solución de cloroformo:metanol 1:1 (1ml por cada 100mg de lípidos). Una alícuota de 50µl de solución de lípidos fue derivatizada con el reactivo de metil esterificación Meth-Prep II (Alltech Associates Inc., Deerfield, IL, USA) para producir los metil-ésteres de los ácidos grasos.

Los metil-ésteres de los ácidos grasos se analizaron en un cromatógrafo de gases Shimadzu GC-14A equipado con un detector de ionización de llama (260ºC). La separación se llevó a cabo con una columna Supelco® Omegawax 320, de 30 m x 0.32 mm x 0.25 µm de grosor de película. La separación se realizó mediante una rampa de temperatura (temperatura inicial de 80ºC, 10ºC/min hasta 190ºC, 20 min a 190ºC, 2ºC/min hasta 220ºC y 10 min 220ºC). Se utilizó helio como gas transportador y la inyección se hizo en modo "split" (relación 1:50). Los metil-esteres de los ácidos grasos se identificaron por comparación con los tiempos de retención de una mezcla estándar de ácidos grasos (Supelco 37 component FAME Mix, Inc., Bellefonte, PA, USA). Cada ácido graso se reporta como porcentaje del total de ácidos grasos identificados en cada tejido analizado.

Análisis estadístico

Los resultados se sometieron a un análisis estadístico descriptivo, análisis de varianza de una vía y pruebas de Duncan para la comparación de promedios (Snedecor y Cochran 1980).

Resultados y discusión

Análisis bromatológico y microbiológico del ensilaje de víscera de trucha.

Se destaca el buen contenido de proteína y de grasa del ensilaje de víscera de trucha con 20.4% y 53.5%, respectivamente. Similares resultados obtuvieron Ponce y Gernat (2002), Correa y Palomino (2000) y Berenz (1994). El aporte energético estimado a partir de esta composición es de 4852,3 kcal EM/kg de materia seca.

No se encontraron niveles detectables de peróxidos en el ensilado, similares resultados obtuvieron Fagberno y Jauncey (1998), cuando compararon el poder antioxidante del extracto de cebolla respecto al etoxiquín en el ensilado de pescado y concluyen que el extracto de cebolla, conservó más eficientemente la grasa durante el proceso de fermentación respecto al etoxiquín. Esto demuestra que el extracto de cebolla conserva adecuadamente la estabilidad de los ácidos grasos.

El contenido de hongos, Salmonela, E. Coli, Clostridium, fue menor de 20ufc/ml y un recuento total de microorganismos de 30 x 10³ufc/ml. Estos resultados permiten considerar al EVT como un recurso alimenticio apto para el consumo animal.

Composición de ácidos grasos de las dietas experimentales.

Al incluir EVTCH en la dieta de pollo de engorde se incrementó el nivel total de ácidos grasos n-3 desde 1.2% en la dieta testigo hasta 5.2% en la dieta experimental a expensas de la reducción del ácido linoleico, oleico y palmítico (Tabla 2). El efecto más marcado se observó sobre la relación n-6:n-3, la cual se reduce de 22.2 en la dieta maíz-soya a 4.4 en la dieta con el 20% de inclusión de EVT.

Parámetros productivos

El mayor peso al sacrificio (P<0.05) se presentó en los pollos que consumieron la dieta con 20% de inclusión de ensilaje de vísceras de trucha, con un peso promedio de 2.250g (Tabla 3) y el grupo experimental sin inclusión de ensilaje de vísceras de trucha presentó el menor peso corporal al sacrificio. Similares resultados obtuvieron Ponce y German (2002) con inclusión de ensilaje de subproductos de tilapia, Kjos Et al (2000) con ensilaje de pescado y López-Ferrer et al (2001) con aceite de pescado en la dieta de pollos de engorde.

Este comportamiento podría explicarse por un mayor consumo de alimento presentado por los pollos de engorde del grupo con 20% de inclusión de EVT, con un consumo de 3.725 g. cuando se compara con el grupo testigo cuyo consumo fue de 3.570 g., posiblemente explicado por una mayor palatabilidad debido a la cepa láctica presente en el ensilado o al contenido de melaza. Berenz (1994) también observó preferencia por las dietas con ensilaje de residuos de sardina. Por el contrario, Kjos et al (2000) encontraron bajos consumos al incluir ensilajes de pescado en la dieta de pollos de engorde. Estos resultados contrastantes podrían estar asociados a otros factores que modulan el consumo de alimento en aves, tales como la temperatura ambiente, la concentración de energía en la dieta y la textura, entre otros (Leeson et al 2000).

Con la inclusión de ensilaje de víscera de trucha, no se observaron diferencias en la conversión de alimento, pero se mejoró en un 4%, que puede ser económicamente significativo, estos resultados coinciden con lo reportado por Berenz (1994) y Crespo y García (2002).

Con 20% de inclusión de EVT se observó el mejor comportamiento productivo, además, el 50 a 52% (Crecimiento y finalización) de la energía fue aportada por el ensilaje de víscera de trucha, reduciéndose la utilización de maíz hasta en un 25% y un 100% para el aceite. Posiblemente el contenido de grasa más alto para este grupo tuvo una acción sinérgica en la eficiencia de utilización del alimento asociada a un menor incremento calórico y mayor tiempo de permanencia en el tracto digestivo (Leeson y Summers 2001).

Deposición de grasa corporal

No se presentaron diferencias significativas para el contenido de grasa abdominal, hígado y pechuga (Tabla 4), pero en muslo (grasa intramuscular), se encontró un aumento de 60% en el contenido de grasa en el grupo con 20% de inclusión de EVT, cuando se compara con el grupo al cual no se incluyó EVT (P<0.05). Aunque la dinámica de la deposición de grasa corporal es multifactorial, en el presente estudio podría estar asociada con el contenido de ácidos grasos n-3 en la dieta, por ejemplo, Crespo y García (2002) observaron un comportamiento similar y concluyen que las dietas ricas en ácidos grasos poliinsaturados de la serie n-3 no incrementan la deposición de grasa abdominal, pero si producen un incremento en la grasa intramuscular.

Composición de ácidos grasos

Composición de ácidos grasos de la pechuga

Los ácidos grasos EPA (C20:5n-3), DPA (C22:5n-3) y DHA (C22:6n-3) no se detectaron en los pollos alimentados con la dieta control, sin inclusión de EVT (Tabla 5). Con la inclusión de 20% de EVT, se obtuvo 1.3% de EPA y DPA y 8.4% de DHA; pero al igual que en la dieta, el efecto más importante fue sobre la relación de ácidos grasos n-6:n-3 que se modificó desde 29.7 sin inclusión de EVT hasta 2.3 y 1.7 con inclusión de 10 y 20% de EVT (P<0.01) debido a que se incrementó la deposición de ácidos grasos de la serie n-3 en detrimento de la deposición de los ácidos grasos de la serie n-6.

Este efecto directo observado con la modificación de la composición de ácidos grasos de la dieta sobre la composición de la canal ha sido encontrado por otros investigadores (López-Ferrer et al (1999) y Hulan et al (1999). Se sugiere que los ácidos grasos poliinsaturados son preferiblemente depositados en la grasa muscular, debido a que son incorporados en los fosfolípidos de las membranas celulares, los cuales constituyen la mayor proporción de grasa muscular (Crespo y García 2002).

López-Ferrer et al (2001) al incluir un 4% de aceite de pescado en la dieta de pollos de engorde, obtuvieron 2.42% de ácidos grasos n-3 en pechuga, inferiores a los encontrados en el presente estudio. Además, el nivel de ácido α-linolénico encontrado supera los reportados por López-Ferrer et al (2001) y Crespo y García (2002) con la inclusión de linasa en la dieta de pollos de engorde.

El grupo control presentó el mayor porcentaje de ácido palmítico (C16:0) con 30.9% (P<0.001) y de oleico (18:1) con 34.1% (P<0.05).

Composición de ácidos grasos del muslo

Se observa una dinámica distinta de deposición de ácidos grasos en el muslo cuando se compara con la pechuga en respuesta a la inclusión de ensilaje de víscera en la dieta. Mientras que en pechuga se logra obtener un nivel de 11.7% de ácidos grasos n-3, en el muslo, solo se obtiene un 4.5%. Se encontró una menor deposición de ácido palmítico, de ácidos grasos saturados y de la serie n-3, con mayor concentración de ácido linoleico. La relación de ácidos grasos omega-6: omega-3 se redujo de 19.8 para los pollos que no consumieron EVT hasta 4.1 para los pollos que consumieron la dieta con 20% de EVT (P<0.05)(Tabla 6).

Composición de ácidos grasos del hígado

Este órgano presenta un mayor contenido de ácido esteárico, EPA, DHA y n-3 totales, comparado con los tejidos anteriormente citados, con un menor contenido de ácidos grasos n-6 (Tabla 7). Los ácidos grasos de mayor participación porcentual en el perfil son el palmitito, esteárico y oleico. El ácido palmítico se presentó en una menor proporción en los pollos que consumieron la dieta con 20% de EVT (P<0.05). No se detectó la presencia de ácido -linolenico (C18:3n-3) en el hígado de los pollos en ninguno de los grupos experimentales. Bernardinni et al (1999) señalan que el hígado tiene el papel más importante en la síntesis de ácidos grasos y es el tejido más rico en ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga de las series n-6 y n-3. En este órgano el ácido -linolénico es convertido eficientemente en EPA y DHA sobre todo cuando la relación n-3:n-6 es alta, como se presentó en este estudio.

Relación entre ácidos grasos omega-3 de la dieta respecto a la canal

En todas las fracciones de la canal se observó una relación cuadrática (Tabla 8) con el contenido de ácidos eicosapentaenoico, docosahexaenoico, y omega-3 del alimento. Con base en estas superficies de respuesta se deduce que la pechuga tiene el mayor potencial de deposición de DHA y de omega-3 totales, donde se estima un máximo de 8.56% y 11.19%, respectivamente cuando la dieta contiene 2.7% de DHA y 5.0% de ácidos grasos omega-3.

Conclusiones

• Con la inclusión de ensilaje de víscera de trucha en la dieta del pollo de engorde se reduce un 25% la inclusión de maíz y un 100% la inclusión de grasa, el EVT es una alternativa sostenible para reducir los costos de producción.

• El ensilaje de víscera de trucha se podría considerar una fuente de ácidos grasos n-3 de bajo costo, si consideramos que estas fuentes de ácidos grasos n-3 tanto en la dieta de los humanos como en la dieta de los animales son escasas y de alto costo.

• Con la inclusión de ensilaje de víscera de trucha en la dieta del pollo de engorde en etapa de finalización se cambió la composición de ácidos grasos de la canal, principalmente se aumentó el contenido de ácidos grasos n-3, se redujo el contenido de ácidos grasos n-6 y se mejoró la relación entre ácidos grasos n-6:n-3.

Agradecimientos

Departamento de Investigaciones de la Universidad de La Salle por el apoyo económico, Laboratorio de Toxicología y nutrición, Universidad Nacional de Colombia por su apoyo logístico. Corpoica, por su colaboración en el trabajo de campo.

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